課程內(nèi)容
《菊花的組織培養(yǎng)》
由于菊花的病毒種類(lèi)比較多，而且危害較為嚴(yán)重。使用扦插繁殖苗，容易引起病毒病的擴(kuò)張和蔓延。
一、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程
細(xì)胞分化
細(xì)胞分化的本質(zhì)是什么？
在一個(gè)發(fā)育中，由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性的差異的過(guò)程稱(chēng)為細(xì)胞分化
干細(xì)胞是一類(lèi)具有分離和分化能力的細(xì)胞
全能性
受精卵能夠分化出各種細(xì)胞、組織，形成一個(gè)完整的個(gè)體，所以把受精卵的分化潛能稱(chēng)為全能性
絕大多數(shù)植物細(xì)胞具有全能性
成熟動(dòng)物細(xì)胞的核仍保留完整的基因組DNA
組織培養(yǎng)基本過(guò)程
組織培養(yǎng)就是取一部分植物組織，如葉、芽、莖、根、花瓣或花粉等，在無(wú)菌條件下接種在三角瓶中的瓊脂培養(yǎng)基上，給予一定的溫度和光照，使之產(chǎn)生愈傷組織，或進(jìn)而生根發(fā)芽。
愈傷組織
在無(wú)菌條件下，將植物器官或組織（如芽、莖尖、根尖或花藥）的一部分切下來(lái)，放在適當(dāng)?shù)娜斯づ囵B(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，這些器官或組織就會(huì)進(jìn)行細(xì)胞分裂，形成新的組織
愈傷組織是一種高度液泡化的無(wú)定形的薄壁細(xì)胞
脫分化
脫分化又稱(chēng)去分化。是指分化細(xì)胞失去特有的結(jié)構(gòu)和功能變?yōu)榫哂形捶只?xì)胞特性的過(guò)程。
再分化
已經(jīng)脫分化的細(xì)胞在一定條件下，有客經(jīng)過(guò)愈傷組織，再分化出根和芽，形成胚狀體或完整植株，這一過(guò)程叫作再分化
再分化形成的試管苗，移栽到地里，可以發(fā)育成完整的植物體。
二、影響植物組織培養(yǎng)的因素
MS培養(yǎng)基是目前使用最普遍的培養(yǎng)基。其具有較高的無(wú)機(jī)鹽濃度，能夠保證組織生長(zhǎng)所需的礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)還能加速愈傷組織的生長(zhǎng)。
大量元素
微量元素
有機(jī)物
關(guān)鍵性激素？
兩種激素的使用順序及比例
先使用生長(zhǎng)激素？
先使用細(xì)胞分裂素？
同時(shí)使用？
愈傷組織是生根還是生芽均與細(xì)胞分裂素同生長(zhǎng)素的適宜比例有關(guān)，有利于誘導(dǎo)根的分化時(shí)，細(xì)胞分裂素/生長(zhǎng)素的比值（A）
A、低
B、相等
C、高
D、不確定
植物組織培養(yǎng)條件
含有全部營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無(wú)菌環(huán)境、適合的PH、適時(shí)光照等。
離體的植物器官、組織、細(xì)胞—→脫分化—→愈傷組織—→再分化—→根莖—→植物體
三、實(shí)驗(yàn)操作
制備MS固體培養(yǎng)基
1、配制各種母液
2、配置培養(yǎng)基（注意兩點(diǎn)）
3、滅菌
MS培養(yǎng)基中各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用是什么？肉湯培養(yǎng)基相比，MS培養(yǎng)基有哪些特點(diǎn)？
外植體消毒：
旺盛嫩枝—→（流水）沖洗刷洗20分鐘左右—→（無(wú)菌吸水紙）吸干表面水分—→（70%的酒精）搖動(dòng)2~3次6-7秒—→（無(wú)菌水）清洗—→（無(wú)菌吸水紙）吸干表面水分—→（氯化汞）溶液浸泡1~2分鐘—→（無(wú)菌水）清洗3次
接種、培養(yǎng)、移栽和栽培
1、前期準(zhǔn)備？
2、接種操作
（接種過(guò)程中插入外植體時(shí)形態(tài)學(xué)上端朝上）
3、培養(yǎng)過(guò)程應(yīng)該放在無(wú)菌箱中進(jìn)行，并定期進(jìn)行消毒，保持適宜的溫度和光照。
4、移栽前應(yīng)先打開(kāi)培養(yǎng)瓶的封口膜，讓其在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日，然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。
污染途徑
1、外植體帶菌
2、培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底
3、接種操作時(shí)帶入
4、環(huán)境不清潔
課堂總結(jié)、點(diǎn)評(píng)
菊花的組織培養(yǎng)—→基本原理—→細(xì)胞的全能性
—→基本過(guò)程—→脫分化—→愈傷組織—→再分化
—→影響因素—→材料性質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、調(diào)節(jié)物質(zhì)、環(huán)境條件
—→操作流程—→配置MS固體培養(yǎng)基—→外植體的消毒—→接種—→培養(yǎng)—→移栽—→栽培
